Klonowanie molekularne, czyli jak umieścić obcy materiał genetyczny w komórce. Bazy danych plazmidów

Płytki krwi (płytki krwi) powstają w czerwonym szpiku kostnym. Zawartość w 1 ml krwi wynosi 300 tys. Żywotność 7-9 dni.

Krzepnięcie krwi w przypadku uszkodzenia naczyń krwionośnych zachodzi w 2 etapach. Najpierw płytki krwi sklejają się i tworzy się tymczasowy (kruchy) skrzep. Następnie pod działaniem enzymu trombiny rozpuszczone we krwi białko fibrynogenu przekształca się w nierozpuszczalną fibrynę, nici fibryny sklejają się i powstaje trwały skrzep krwi.

Przyczyną niekrzepliwości krwi może być niedobór wapnia, witaminy K (wytwarzanej przez mikroflorę jelitową) lub choroba dziedziczna (hemofilia).

W przypadku „nieprawidłowej” transfuzji krwi przetoczone czerwone krwinki niosą obce antygeny, więc są pochłaniane przez lokalne fagocyty. Masowe zniszczenie czerwonych krwinek prowadzi do krzepnięcia krwi bezpośrednio w naczyniach. (Przy „prawidłowej” transfuzji krwi przetoczone przeciwciała (aglutyniny) okazują się obcymi cząsteczkami; ich zniszczenie przez lokalne fagocyty nie prowadzi do negatywnych konsekwencji.)

Testy

1. Istotą procesu krzepnięcia krwi jest
A) adhezja czerwonych krwinek
B) przejście rozpuszczalnego białka fibrynogenu do nierozpuszczalnego białka fibryny
C) wzrost liczby powstających pierwiastków w 1 cm3 krwi
D) nagromadzenie leukocytów wokół ciał obcych i mikroorganizmów

2. Bierze udział w krzepnięciu krwi
A) czerwone krwinki
B) limfocyty
B) leukocyty
D) płytki krwi

3. Istotą krzepnięcia krwi jest
A) adhezja czerwonych krwinek
B) konwersja fibrynogenu do fibryny
B) konwersja leukocytów w limfocyty
D) sklejanie leukocytów

4. Przed zabiegiem określa się liczbę płytek krwi we krwi pacjenta
A) scharakteryzuj stan układu odpornościowego
B) określić zawartość tlenu we krwi
C) zidentyfikować brak (lub obecność) procesu zapalnego w organizmie
D) określić szybkość krzepnięcia krwi

5. Rozpoczyna się proces krzepnięcia krwi
A) podwyższone ciśnienie krwi
B) zniszczenie płytek krwi
B) nagromadzenie krwi żylnej w naczyniu
D) powstawanie lokalnego ogniska zapalnego

6. Jednym z etapów powstawania skrzepliny w naczyniu krwionośnym jest
A) ropienie rany
B) synteza hemoglobiny
B) tworzenie fibryny
D) wzrost liczby płytek krwi

7. Jaka jest podstawa powstania zakrzepu krwi?
A) przeciwciało
B) hemoglobina
B) cholesterol
D) fibryna

8. Jak nazywają się wolne od jąder pierwiastki krwi, których zniszczenie prowadzi do krzepnięcia krwi?
A) czerwone krwinki
B) płytki krwi
B) limfocyty
D) makrofagi

9. Jaką rolę odgrywają płytki krwi w ludzkiej krwi?
A) transportują końcowe produkty metabolizmu
B) transportują składniki odżywcze
B) biorą udział w fagocytozie
D) biorą udział w jego koagulacji

10. Z sieci nici powstaje skrzeplina zatykająca uszkodzony obszar naczynia
A) fibryna
B) trombina
B) fibrynogen
D) zapadanie się płytek krwi

11. Które komórki krwi charakteryzują się następującymi cechami: płaskie, małe, o nieregularnym kształcie, wolne od jąder formacje, które żyją przez kilka dni?
A) płytki krwi
B) limfocyty
B) czerwone krwinki
D) fagocyty

12. Z czego głównie składa się skrzep krwi?
A) protrombina
B) trombina
B) fibryna
D) fibrynogen

13. Wybierz właściwą opcję opisującą powstawanie skrzepu krwi: pod wpływem X, Y rozpuszczone we krwi zamienia się w Z
A) X-trombina Y-fibrynogen Z-fibryna
B) X-fibryna Y-trombina Z-fibrynogen
B) Fibryna X, fibrynogen Y, Z-trombina
D) X-fibrynogen Y-trombina Z-fibryna

W przypadku przypadkowego uszkodzenia małych naczyń krwionośnych, powstałe krwawienie po pewnym czasie ustaje. Jest to spowodowane tworzeniem się skrzepliny lub skrzepu w miejscu uszkodzenia naczynia. Proces ten nazywa się krzepnięciem krwi.

Obecnie istnieje klasyczna enzymatyczna teoria krzepnięcia krwi - Teoria Schmidta-Morawitza. Założenia tej teorii przedstawiono na schemacie (ryc. 11):

Uszkodzenie naczynia krwionośnego powoduje kaskadę procesów molekularnych, w wyniku których powstaje skrzep krwi – skrzeplina, która wstrzymuje przepływ krwi. W miejscu urazu płytki krwi przyczepiają się do otwartej macierzy międzykomórkowej; pojawia się czop płytkowy. Jednocześnie aktywowany jest układ reakcji prowadzący do przekształcenia rozpuszczalnego fibrynogenu białka osocza w nierozpuszczalną fibrynę, która odkłada się w czopie płytkowym i na jego powierzchni tworzy się skrzep krwi.

Proces krzepnięcia krwi przebiega w dwóch fazach.

W pierwszej fazie protrombina pod wpływem trombokinazy przekształca się w aktywny enzym trombinę, zawarty w płytkach krwi i uwalniany z nich podczas niszczenia płytek krwi i jonów wapnia.

W drugiej fazie pod wpływem utworzonej trombiny fibrynogen przekształca się w fibrynę.

Cały proces krzepnięcia krwi jest reprezentowany przez następujące fazy hemostazy:

a) skurcz uszkodzonego naczynia;

b) tworzenie się w miejscu uszkodzenia luźnego czopu płytkowego lub białego skrzepliny. Kolagen w naczyniu służy jako ośrodek wiążący dla płytek krwi. Podczas agregacji płytek krwi uwalniane są aminy wazoaktywne, które stymulują zwężenie naczyń;

c) tworzenie się czerwonego skrzepu (skrzepu krwi);

d) częściowe lub całkowite rozpuszczenie skrzepu.

Biały skrzep powstaje z płytek krwi i fibryny; zawiera stosunkowo niewiele czerwonych krwinek (w warunkach dużego przepływu krwi). Czerwony skrzep krwi składa się z czerwonych krwinek i fibryny (w obszarach o powolnym przepływie krwi).

Czynniki krzepnięcia krwi biorą udział w procesie krzepnięcia krwi. Czynniki krzepnięcia związane z płytkami krwi są zwykle oznaczone cyframi arabskimi (1, 2, 3 itd.), a czynniki krzepnięcia występujące w osoczu krwi są oznaczone cyframi rzymskimi.

Czynnik I (fibrynogen) jest glikoproteiną. Syntetyzowany w wątrobie.

Czynnik II (protrombina) jest glikoproteiną. Syntetyzowany w wątrobie przy udziale witaminy K. Zdolny do wiązania jonów wapnia. Hydrolityczny rozkład protrombiny wytwarza aktywny enzym krzepnięcia krwi.

Czynnik III (czynnik tkankowy lub tromboplastyna tkankowa) powstaje, gdy tkanka jest uszkodzona. Lipoproteina.

Czynnik IV (jony Ca 2+). Niezbędny do tworzenia aktywnego czynnika X i aktywnej tromboplastyny ​​tkankowej, aktywacji prokonwertyny, tworzenia trombiny i labilizacji błon płytek krwi.

Czynnik V (proakceleryna) jest globuliną. Prekursor akceleryny, syntetyzowany w wątrobie.

Czynnik VII (antyfibrynolizyna, prokonwertyna) jest prekursorem konwertyny. Syntetyzowany w wątrobie przy udziale witaminy K.

Czynnik VIII (globulina antyhemofilowa A) jest niezbędny do tworzenia aktywnego czynnika X. Wrodzony niedobór czynnika VIII jest przyczyną hemofilii A.

Czynnik IX (antyhemofilowa globulina B, czynnik Christmasa) bierze udział w tworzeniu aktywnego czynnika X. W przypadku niedoboru czynnika IX rozwija się hemofilia B.

Czynnik X (czynnik Stewarta-Prowera) jest globuliną. Czynnik X bierze udział w tworzeniu trombiny z protrombiny. Syntetyzowany przez komórki wątroby z udziałem witaminy K.

Czynnik XI (czynnik Rosenthala) jest antyhemofilowym czynnikiem białkowym. Niedobór obserwuje się w przypadku hemofilii C.

Czynnik XII (czynnik Hagemana) bierze udział w mechanizmie wyzwalającym krzepnięcie krwi, stymuluje aktywność fibrynolityczną i inne reakcje obronne organizmu.

Czynnik XIII (czynnik stabilizujący fibrynę) – bierze udział w tworzeniu wiązań międzycząsteczkowych w polimerze fibryny.

Czynniki płytkowe. Obecnie znanych jest około 10 indywidualnych czynników płytkowych. Przykładowo: Czynnik 1 – proakceleryna zaadsorbowana na powierzchni płytek krwi. Czynnik 4 - czynnik antyheparynowy.

W normalnych warunkach we krwi nie ma trombiny, powstaje ona z białka osocza protrombiny pod wpływem enzymu proteolitycznego czynnika Xa (indeks a - forma aktywna), który powstaje podczas utraty krwi z czynnika X. Czynnik Xa ulega konwersji protrombinę w trombinę tylko w obecności jonów Ca 2 + i innych czynników krzepnięcia.

Czynnik III, który przenika do osocza krwi, gdy tkanka jest uszkodzona, oraz czynnik płytkowy 3 stwarzają warunki wstępne do wytworzenia początkowej ilości trombiny z protrombiny. Katalizuje konwersję proakceleryny i prokonwertyny do akceleryny (czynnik Va) i konwertyny (czynnik VIIa).

Kiedy te czynniki oddziałują, a także jony Ca 2+, powstaje czynnik Xa. Następnie z protrombiny powstaje trombina. Pod wpływem trombiny z fibrynogenu ulegają odszczepieniu 2 peptydy A i 2 peptydy B. Fibrynogen przekształca się w dobrze rozpuszczalny monomer fibryny, który przy udziale czynnika stabilizującego fibrynę (enzymu transglutaminazy) szybko polimeryzuje do nierozpuszczalnego polimeru fibryny. obecność jonów Ca 2+ (ryc. 12).

Skrzep fibrynowy przyłącza się do macierzy w obszarze uszkodzenia naczyń przy udziale białka fibronektyny. Po utworzeniu włókien fibrynowych następuje ich skurcz, do czego potrzebna jest energia ATP i czynnika płytkowego 8 (trombostenina).

U osób z dziedzicznymi defektami transglutaminazy skrzepy krwi powstają w taki sam sposób jak u osób zdrowych, z tą różnicą, że skrzep jest kruchy, dlatego łatwo dochodzi do krwawień wtórnych.

Krwawienie z naczyń włosowatych i małych naczyń ustaje, gdy tworzy się czop płytkowy. Zatrzymanie krwawienia z większych naczyń wymaga szybkiego utworzenia silnego skrzepu, aby zminimalizować utratę krwi. Osiąga się to poprzez kaskadę reakcji enzymatycznych z mechanizmami amplifikacji na wielu etapach.

Istnieją trzy mechanizmy aktywacji enzymów kaskadowych:

1. Częściowa proteoliza.

2. Oddziaływanie z białkami aktywatorowymi.

3. Oddziaływanie z błonami komórkowymi.

Enzymy szlaku prokoagulacyjnego zawierają kwas γ-karboksyglutaminowy. Rodniki kwasu karboksyglutaminowego tworzą miejsca wiązania jonów Ca 2+. W przypadku braku jonów Ca 2+ krew nie krzepnie.

Zewnętrzne i wewnętrzne drogi krzepnięcia krwi.

W zewnątrzpochodny szlak krzepnięcia krwi tromboplastyna (czynnik tkankowy, czynnik III), prokonwertyna (czynnik VII), czynnik Stewarta (czynnik X), proakceleryna (czynnik V), a także Ca 2+ i fosfolipidy powierzchni błon, na których tworzy się skrzep. Homogenaty wielu tkanek przyspieszają krzepnięcie krwi: działanie to nazywa się działaniem tromboplastyny. Prawdopodobnie ma to związek z obecnością w tkankach jakiegoś specjalnego białka. Czynniki VII i X są proenzymami. Są one aktywowane poprzez częściową proteolizę, zamieniając się w enzymy proteolityczne - odpowiednio czynniki VIIa i Xa. Czynnik V jest białkiem, które pod wpływem trombiny przekształca się w czynnik V, który nie jest enzymem, ale aktywuje enzym Xa w mechanizmie allosterycznym; aktywacja jest wzmocniona w obecności fosfolipidów i Ca 2+.

Osocze krwi stale zawiera śladowe ilości czynnika VIIa. Kiedy tkanki i ściany naczyń ulegają uszkodzeniu, uwalniany jest czynnik III, silny aktywator czynnika VIIa; aktywność tego ostatniego wzrasta ponad 15 000 razy. Czynnik VIIa odcina część łańcucha peptydowego czynnika X, przekształcając go w enzym-czynnik Xa. Podobnie Xa aktywuje protrombinę; powstała trombina katalizuje konwersję fibrynogenu do fibryny, a także konwersję prekursora transglutaminazy do aktywnego enzymu (czynnik XIIIa). Ta kaskada reakcji ma pętle dodatniego sprzężenia zwrotnego, które poprawiają wynik końcowy. Czynnik Xa i trombina katalizują konwersję nieaktywnego czynnika VII do enzymu VIIa; trombina przekształca czynnik V w czynnik V, który wraz z fosfolipidami i Ca 2+ zwiększa aktywność czynnika Xa 10 4–10 5 razy dzięki dodatniemu sprzężeniu zwrotnemu, szybkości tworzenia samej trombiny, a co za tym idzie konwersji fibrynogenu w fibrynę wzrasta jak lawina i w ciągu 10-12 minut krew krzepnie.

Krzepnięcie krwi mechanizm wewnętrzny zachodzi znacznie wolniej i wymaga 10-15 minut. Mechanizm ten nazywa się wewnętrznym, ponieważ nie wymaga tromboplastyny ​​(czynnika tkankowego), a wszystkie niezbędne czynniki zawarte są we krwi. Wewnętrzny mechanizm krzepnięcia reprezentuje także kaskadę kolejnych aktywacji proenzymów. Począwszy od etapu przemiany czynnika X w Xa, szlaki zewnętrzne i wewnętrzne są takie same. Podobnie jak szlak zewnętrzny, wewnętrzny szlak krzepnięcia ma dodatnie sprzężenie zwrotne: trombina katalizuje konwersję prekursorów V i VIII w aktywatory V i VIII, co ostatecznie zwiększa szybkość tworzenia samej trombiny.

Zewnętrzne i wewnętrzne mechanizmy krzepnięcia krwi wzajemnie na siebie oddziałują. Czynnik VII, specyficzny dla zewnątrzpochodnego szlaku krzepnięcia, może być aktywowany przez czynnik XIIa, który bierze udział w wewnętrznym szlaku krzepnięcia. Dzięki temu obie ścieżki stają się jednym systemem krzepnięcia krwi.

Hemofilia. Dziedziczne defekty białek biorących udział w krzepnięciu krwi objawiają się zwiększonym krwawieniem. Najczęstszą chorobą spowodowaną brakiem czynnika VIII jest hemofilia A. Gen czynnika VIII jest zlokalizowany na chromosomie X; Uszkodzenie tego genu objawia się jako cecha recesywna, dlatego kobiety nie chorują na hemofilię A. U mężczyzn z jednym chromosomem X dziedziczenie wadliwego genu powoduje hemofilię. Objawy choroby są zwykle wykrywane we wczesnym dzieciństwie: przy najmniejszym skaleczeniu lub nawet samoistnym krwawieniu; charakterystyczne są krwotoki śródstawowe. Częsta utrata krwi prowadzi do rozwoju niedokrwistości z niedoboru żelaza. Aby zatrzymać krwawienie w przypadku hemofilii, podaje się świeżą krew dawcy zawierającą czynnik VIII lub preparaty czynnika VIII.

Hemofilia B. Hemofilia B jest spowodowana mutacjami w genie czynnika IX, który podobnie jak gen czynnika VIII jest zlokalizowany na chromosomie płciowym; mutacje są recesywne, dlatego hemofilia B występuje tylko u mężczyzn. Hemofilia B występuje około 5 razy rzadziej niż hemofilia A. Hemofilię B leczy się poprzez podawanie leków zawierających czynnik IX.

Na zwiększone krzepnięcie krwi Mogą tworzyć się wewnątrznaczyniowe skrzepy krwi, zatykające nienaruszone naczynia (stany zakrzepowe, trombofilia).

Fibrynoliza. Skrzeplina rozpuszcza się w ciągu kilku dni po utworzeniu. Główną rolę w jego rozpuszczaniu odgrywa enzym proteolityczny plazmina. Plazmina hydrolizuje wiązania peptydowe w fibrynie utworzonej przez reszty argininy i tryptofanu i powstają rozpuszczalne peptydy. Prekursor plazminy, plazminogen, występuje w krążącej krwi. Jest aktywowany przez enzym urokinazę, który występuje w wielu tkankach. Plaminogen może być aktywowany przez kalikreinę, również obecną w skrzepie krwi. Plazminę można również aktywować w krążącej krwi, nie uszkadzając naczyń krwionośnych. Tam plazmina jest szybko inaktywowana przez inhibitor białka α 2 - antyplazminę, natomiast wewnątrz skrzepliny jest chroniona przed działaniem inhibitora. Urokinaza jest skutecznym lekarstwem na rozpuszczanie skrzepów krwi lub zapobieganie ich tworzeniu się w zakrzepowym zapaleniu żył, zatorowości płucnej, zawale mięśnia sercowego i interwencjach chirurgicznych.

Układ antykoagulant. Podczas rozwoju układu krzepnięcia krwi w procesie ewolucji rozwiązano dwa przeciwstawne zadania: zapobieganie wyciekom krwi w przypadku uszkodzenia naczyń krwionośnych oraz utrzymywanie krwi w stanie ciekłym w nieuszkodzonych naczyniach. Drugi problem rozwiązuje układ antykoagulantowy, który jest reprezentowany przez zestaw białek osocza, które hamują enzymy proteolityczne.

Antytrombina III, białko osocza, hamuje wszystkie proteinazy biorące udział w krzepnięciu krwi, z wyjątkiem czynnika VIIa. Nie działa na czynniki wchodzące w skład kompleksów z fosfolipidami, a jedynie na te, które występują w osoczu w stanie rozpuszczonym. Dlatego konieczne jest nie regulowanie powstawania skrzepów krwi, ale eliminowanie enzymów, które dostają się do krwiobiegu z miejsca tworzenia się skrzepliny, zapobiegając w ten sposób rozprzestrzenianiu się krzepnięcia krwi na uszkodzone obszary krwiobiegu.

Heparyna jest stosowana jako lek zapobiegający krzepnięciu krwi. Heparyna nasila hamujące działanie antytrombiny III: dodatek heparyny indukuje zmiany konformacyjne, które zwiększają powinowactwo inhibitora do trombiny i innych czynników. Po połączeniu tego kompleksu z trombiną uwalniana jest heparyna, która może łączyć się z innymi cząsteczkami antytrombiny III. Zatem każda cząsteczka heparyny może aktywować dużą liczbę cząsteczek antytrombiny III; pod tym względem działanie heparyny jest podobne do działania katalizatorów. Heparyna jest stosowana jako antykoagulant w leczeniu chorób zakrzepowych. Znana jest wada genetyczna polegająca na tym, że stężenie antytrombiny III we krwi jest o połowę mniejsze niż normalnie; tacy ludzie często doświadczają zakrzepicy. Antytrombina III jest głównym składnikiem układu przeciwzakrzepowego.

W osoczu krwi znajdują się inne białka - inhibitory proteinaz, które mogą również zmniejszać prawdopodobieństwo krzepnięcia wewnątrznaczyniowego. Takim białkiem jest α 2 - makroglobulina, która hamuje wiele proteinaz, i to nie tylko tych biorących udział w krzepnięciu krwi. α2-Makroglobulina zawiera odcinki łańcucha peptydowego będące substratami wielu proteinaz; Do tych miejsc przyłączają się proteinazy, hydrolizują w nich niektóre wiązania peptydowe, w wyniku czego zmienia się konformacja α 2 -makroglobuliny, która wychwytuje enzym niczym pułapka. Enzym nie ulega w tym przypadku uszkodzeniu: w połączeniu z inhibitorem jest w stanie hydrolizować peptydy o niskiej masie cząsteczkowej, jednak centrum aktywne enzymu nie jest dostępne dla dużych cząsteczek. Kompleks α2-makroglobuliny z enzymem jest szybko usuwany z krwi: jego okres półtrwania we krwi wynosi około 10 minut. W przypadku masowego przedostania się aktywowanych czynników krzepnięcia krwi do krwioobiegu skuteczność układu antykoagulacyjnego może być niewystarczająca i istnieje ryzyko zakrzepicy.

Witamina KŁańcuchy peptydowe czynników II, VII, IX i X zawierają niezwykły aminokwas – γ-karboksyglutaminę. Aminokwas ten powstaje z kwasu glutaminowego w wyniku potranslacyjnej modyfikacji następujących białek:

Reakcje, w których biorą udział czynniki II, VII, IX i X, są aktywowane przez jony Ca 2+ i fosfolipidy: Rodniki kwasu γ-karboksyglutaminowego tworzą na tych białkach centra wiązania Ca 2+. Wymienione czynniki, a także czynniki V” i VIII”, przyłączają się do dwuwarstwowych błon fosfolipidowych oraz do siebie nawzajem przy udziale jonów Ca 2+ i w takich kompleksach następuje aktywacja czynników II, VII, IX i X. Jon Ca 2+ aktywuje także inne reakcje krzepnięcia: odwapniona krew nie krzepnie.

Przekształcenie reszty glutamilowej w resztę kwasu γ-karboksyglutaminowego katalizowane jest przez enzym, którego koenzymem jest witamina K. Niedobór witaminy K objawia się wzmożonymi krwawieniami, krwotokami podskórnymi i wewnętrznymi. W przypadku braku witaminy K powstają czynniki II, VII, IX i X, które nie zawierają reszt γ-karboksyglutaminy. Takie proenzymy nie mogą zostać przekształcone w aktywne enzymy.

Krzepnięcie krwi musi być prawidłowe, dlatego hemostaza opiera się na procesach równowagowych. Nasz cenny płyn biologiczny nie może koagulować - grozi to poważnymi, śmiertelnymi powikłaniami (). Wręcz przeciwnie, powolne tworzenie się skrzepu krwi może skutkować niekontrolowanym masywnym krwawieniem, które może również prowadzić do śmierci człowieka.

Najbardziej złożone mechanizmy i reakcje, angażujące na tym czy innym etapie wiele substancji, utrzymują tę równowagę i w ten sposób umożliwiają organizmowi dość szybkie samodzielne radzenie sobie (bez udziału jakiejkolwiek pomocy z zewnątrz) i powrót do zdrowia.

Szybkości krzepnięcia krwi nie można określić na podstawie jednego parametru, ponieważ w procesie tym bierze udział wiele składników, które wzajemnie się aktywują. Pod tym względem testy na krzepnięcie krwi są różne, gdzie odstępy ich normalnych wartości zależą głównie od metody przeprowadzenia badania, a także w innych przypadkach od płci osoby oraz dni, miesięcy i lat, w których żył. Odpowiedź raczej nie zadowoli czytelnika: „ Czas krzepnięcia krwi wynosi 5 – 10 minut”. Pozostaje wiele pytań...

Każdy jest ważny i każdy jest potrzebny

Zatrzymanie krwawienia opiera się na niezwykle złożonym mechanizmie, obejmującym wiele reakcji biochemicznych, w których bierze udział ogromna liczba różnych składników, a każdy z nich odgrywa swoją specyficzną rolę.

schemat krzepnięcia krwi

Tymczasem brak lub awaria przynajmniej jednego czynnika krzepnięcia lub antykoagulacji może zakłócić cały proces. Oto tylko kilka przykładów:

• Nieodpowiednia reakcja ścian naczyń krwionośnych zakłóca płytki krwi - co „odczuwa” pierwotną hemostazę;
• Niska zdolność śródbłonka do syntezy i wydzielania inhibitorów agregacji płytek krwi (głównym z nich jest prostacyklina) oraz naturalnych antykoagulantów () zagęszcza krew przepływającą przez naczynia, co prowadzi do powstawania w krwiobiegu absolutnie niepotrzebnych dla organizmu skrzepów, który na razie może spokojnie „siedzieć” przyczepiony do ściany jakiegoś naczynia. Stają się one bardzo niebezpieczne, gdy odrywają się i zaczynają krążyć w krwiobiegu, stwarzając w ten sposób ryzyko katastrofy naczyniowej;
• Brak czynnika osoczowego, takiego jak FVIII, powoduje chorobę sprzężoną z płcią - A;
• Hemofilię B stwierdza się u osoby, jeśli z tych samych powodów (mutacja recesywna w chromosomie X, który, jak wiadomo, występuje tylko u mężczyzn), występuje niedobór czynnika Christmana (FIX).

Ogólnie rzecz biorąc, wszystko zaczyna się na poziomie uszkodzonej ściany naczynia, która wydzielając substancje niezbędne do zapewnienia krzepnięcia krwi, przyciąga krążące w krwiobiegu płytki krwi – płytki krwi. Na przykład taki, który „wzywa” płytki krwi na miejsce wypadku i wspomaga ich adhezję do kolagenu, silnego stymulatora hemostazy, musi rozpocząć swoje działanie w odpowiednim czasie i dobrze działać, aby w przyszłości można było liczyć na powstawanie pełnowartościowej wtyczki.

Jeżeli płytki krwi wykorzystują na właściwym poziomie swoją funkcjonalność (funkcję adhezyjno-agregacyjną), szybko włączają się inne elementy hemostazy pierwotnej (naczyniowo-płytkowej) i w krótkim czasie tworzą czop płytkowy, to w celu zatrzymania przepływu krwi z naczynie mikrokrążenia można obejść się bez specjalnego wpływu innych uczestników procesu krzepnięcia krwi. Organizm nie jest jednak w stanie obejść się bez czynników plazmowych, które tworzą pełnoprawny czop zdolny do zamknięcia uszkodzonego naczynia o szerszym świetle.

Zatem w pierwszym etapie (bezpośrednio po uszkodzeniu ściany naczynia) zaczynają zachodzić kolejne reakcje, w których aktywacja jednego czynnika daje impuls do wprowadzenia pozostałych w stan aktywny. A jeśli czegoś gdzieś brakuje lub jakiś czynnik okaże się nie do utrzymania, proces krzepnięcia krwi ulega spowolnieniu lub całkowitemu zatrzymaniu.

Ogólnie mechanizm krzepnięcia składa się z 3 faz, które muszą zapewnić:

• Tworzenie złożonego kompleksu czynników aktywowanych (protrombinaza) i konwersja białka syntetyzowanego przez wątrobę - w trombinę ( faza aktywacji);
• Przekształcenie białka rozpuszczonego we krwi – czynnik I (, FI) w nierozpuszczalną fibrynę przeprowadza się w faza krzepnięcia;
• Zakończenie procesu krzepnięcia wraz z utworzeniem gęstego skrzepu fibrynowego ( faza cofania).

Badania krzepnięcia krwi

Wieloetapowy kaskadowy proces enzymatyczny, którego ostatecznym celem jest utworzenie skrzepu zdolnego do zamknięcia „szczeliny” w naczyniu, prawdopodobnie będzie wydawać się czytelnikowi zagmatwany i niezrozumiały, dlatego wystarczy przypomnieć, że ten mechanizm zapewniają różne czynniki krzepnięcia, enzymy, Ca 2+ (jony wapnia) i wiele innych składników. Jednak w związku z tym pacjentów często interesuje pytanie: jak wykryć, czy coś jest nie tak z hemostazą lub uspokoić się, wiedząc, że systemy działają normalnie? Oczywiście do takich celów służą badania krzepnięcia krwi.

Najbardziej powszechną specyficzną (lokalną) analizę stanu hemostazy uważa się za powszechnie znaną, często przepisywaną przez terapeutów, kardiologów, a także położników-ginekologów i najbardziej pouczającą.

Tymczasem należy zaznaczyć, że przeprowadzanie takiej liczby badań nie zawsze jest uzasadnione. Zależy to od wielu okoliczności: czego szuka lekarz, na jakim etapie kaskady reakcji skupia swoją uwagę, ile czasu ma do dyspozycji personel medyczny itp.

Symulacja zewnętrznego szlaku krzepnięcia krwi

Na przykład zewnętrzna droga aktywacji krzepnięcia w laboratorium może naśladować to, co lekarze nazywają protrombiną Quicka, testem Quicka, czasem protrombinowym (PTT) lub czasem tromboplastyny ​​(różne nazwy tego samego testu). Podstawą tego testu, uzależnioną od czynników II, V, VII, X, jest udział tromboplastyny ​​tkankowej (dodawana jest do osocza odwapnionego cytrynianem podczas pracy z próbką krwi).

Granice wartości normalnych u kobiet i mężczyzn w tym samym wieku nie różnią się od siebie i ograniczają się do przedziału 78 – 142%, natomiast u kobiet spodziewających się dziecka odsetek ten nieznacznie się (ale nieznacznie!) zwiększa. Przeciwnie, u dzieci normy mieszczą się w niższych wartościach i rosną w miarę zbliżania się do dorosłości i później:

Odbicie mechanizmu wewnętrznego w warunkach laboratoryjnych

Tymczasem, aby określić zaburzenie krzepnięcia krwi spowodowane nieprawidłowym działaniem mechanizmu wewnętrznego, podczas analizy nie wykorzystuje się tromboplastyny ​​tkankowej - pozwala to osoczu wykorzystywać wyłącznie własne rezerwy. W warunkach laboratoryjnych mechanizm wewnętrzny jest śledzony poprzez oczekiwanie, aż krew pobrana z naczyń krwionośnych sama się skrzepnie. Początek tej złożonej reakcji kaskadowej zbiega się z aktywacją czynnika Hagemana (czynnika XII). Aktywacja ta jest wyzwalana przez różne warunki (kontakt krwi z uszkodzonymi ścianami naczyń, błonami komórkowymi, które uległy pewnym zmianom), dlatego nazywa się ją aktywacją kontaktową.

Aktywacja kontaktu zachodzi także poza organizmem, np. gdy krew przedostaje się do obcego środowiska i wchodzi z nim w kontakt (kontakt ze szkłem w probówce, instrumentami). Usunięcie jonów wapnia z krwi nie wpływa w żaden sposób na uruchomienie tego mechanizmu, jednakże proces ten nie może zakończyć się utworzeniem skrzepu – ulega on przerwaniu na etapie aktywacji czynnika IX, gdzie nie ma zjonizowanego wapnia dłużej konieczne.

Czas krzepnięcia krwi, czyli czas, w którym będąca wcześniej w stanie płynnym, przelewa się do postaci elastycznego skrzepu, zależy od szybkości przemiany białka fibrynogenu rozpuszczonego w osoczu w nierozpuszczalną fibrynę. Fibryna tworzy nici utrzymujące czerwone krwinki (erytrocyty), powodując, że tworzą one wiązkę zamykającą otwór w uszkodzonym naczyniu krwionośnym. Czas krzepnięcia krwi (1 ml pobrany z żyły – metoda Lee-White’a) w takich przypadkach ogranicza się średnio do 4 – 6 minut. Jednak szybkość krzepnięcia krwi z pewnością ma szerszy zakres wartości cyfrowych (tymczasowych):

1. Krew pobrana z żyły tworzy skrzep od 5 do 10 minut;
2. Czas krzepnięcia Lee-White'a w szklanej probówce wynosi 5–7 minut, w silikonowej probówce wydłuża się do 12–25 minut;
3. W przypadku krwi pobranej z palca następujące wskaźniki są uważane za normalne: początek to 30 sekund, koniec krwawienia to 2 minuty.

Przy pierwszym podejrzeniu poważnych zaburzeń krwawienia stosuje się analizę odzwierciedlającą mechanizm wewnętrzny. Badanie jest bardzo wygodne: przeprowadza się je szybko (w czasie przepływu krwi lub tworzenia się skrzepu w probówce), nie wymaga specjalnych odczynników ani skomplikowanego sprzętu, a pacjent nie wymaga specjalnego przygotowania. Oczywiście wykryte w ten sposób zaburzenia krzepnięcia krwi dają podstawy do przypuszczenia szeregu istotnych zmian w układach zapewniających prawidłowy stan hemostazy i wymuszają prowadzenie dalszych badań w celu ustalenia prawdziwych przyczyn patologii.

Wraz ze wzrostem (wydłużeniem) czasu krzepnięcia krwi można podejrzewać:

• Niedobór czynników osocza zapewniających krzepnięcie lub ich wrodzona niższość, mimo że są one na wystarczającym poziomie we krwi;
• Poważna patologia wątroby skutkująca niewydolnością funkcjonalną miąższu narządu;
• (w fazie, w której zmniejsza się zdolność krwi do krzepnięcia);

W przypadku leczenia heparyną wydłuża się czas krzepnięcia krwi, dlatego pacjenci otrzymujący ten lek muszą dość często poddawać się badaniom wskazującym stan hemostazy.

Rozważany wskaźnik krzepnięcia krwi zmniejsza swoje wartości (skraca):

• W fazie wysokiego krzepnięcia () zespołu DIC;
• W przypadku innych chorób, które spowodowały patologiczny stan hemostazy, czyli gdy pacjent ma już zaburzenia krzepnięcia krwi i jest klasyfikowany jako obciążony podwyższonym ryzykiem wystąpienia zakrzepów krwi (zakrzepica itp.);
• U kobiet stosujących doustne leki zawierające hormony w celu antykoncepcji lub długotrwałego leczenia;
• U kobiet i mężczyzn przyjmujących kortykosteroidy (przy przepisywaniu leków kortykosteroidowych bardzo istotny jest wiek – wiele z nich u dzieci i osób starszych może powodować istotne zmiany w hemostazie, dlatego też ich stosowanie w tej grupie jest zabronione).

Ogólnie normy niewiele się różnią

Wskaźniki krzepliwości krwi (w normie) u kobiet, mężczyzn i dzieci (co oznacza jeden wiek dla każdej kategorii) w zasadzie niewiele się od siebie różnią, chociaż niektóre wskaźniki u kobiet zmieniają się fizjologicznie (przed, w trakcie i po menstruacji, w czasie ciąży), dlatego też przy przeprowadzaniu badań laboratoryjnych nadal uwzględnia się płeć osoby dorosłej. Ponadto u kobiet w okresie rodzenia dziecka niektóre parametry muszą się nawet nieco zmienić, ponieważ organizm po porodzie musi zatrzymać krwawienie, więc układ krzepnięcia zaczyna się przygotowywać z wyprzedzeniem. Wyjątkiem w odniesieniu do niektórych wskaźników krzepnięcia krwi jest kategoria dzieci w pierwszych dniach życia, na przykład u noworodków PTT jest kilka lub trzy razy wyższe niż u dorosłych mężczyzn i kobiet (norma dla dorosłych wynosi 11 - 15 sekund), a u wcześniaków czas protrombinowy wydłuża się o 3 – 5 sekund. To prawda, że ​​​​około 4 dnia życia PTT zmniejsza się i odpowiada normie krzepnięcia krwi u dorosłych.

Poniższa tabela pomoże czytelnikowi zapoznać się z normami poszczególnych wskaźników krzepnięcia krwi i ewentualnie porównać je z własnymi parametrami (jeśli test został przeprowadzony stosunkowo niedawno i istnieje formularz rejestrujący wyniki badania pod ręką):

Podsumowując, pragnę zwrócić uwagę naszych stałych (i oczywiście nowych) czytelników: być może lektura artykułu poglądowego nie w pełni zaspokoi zainteresowanie pacjentów dotkniętych patologią hemostatyczną. Osoby, które po raz pierwszy spotykają się z podobnym problemem, z reguły chcą uzyskać jak najwięcej informacji na temat systemów, które zapewnią zatrzymanie krwawienia w odpowiednim czasie i zapobiegną tworzeniu się niebezpiecznych skrzepów, dlatego zaczynają szukać informacje w Internecie. Cóż, nie powinieneś się spieszyć - w innych sekcjach naszej witryny podano szczegółowy (i, co najważniejsze, poprawny) opis każdego ze wskaźników stanu hemostazy, wskazany jest zakres normalnych wartości i wskazania opisano także przygotowanie do analizy.

Krzepnięcie krwi- to najważniejszy etap układu hemostatycznego, odpowiedzialny za zatrzymanie krwawienia w przypadku uszkodzenia układu naczyniowego organizmu. Tworzy się kombinacja różnych czynników krzepnięcia krwi, oddziałujących ze sobą w bardzo złożony sposób układ krzepnięcia krwi.

Krzepnięcie krwi poprzedza etap pierwotnej hemostazy naczyniowo-płytkowej. Ta pierwotna hemostaza jest prawie całkowicie spowodowana zwężeniem naczyń i mechaniczną okluzją agregatów płytek krwi w miejscu uszkodzenia ściany naczynia. Charakterystyczny czas pierwotnej hemostazy u zdrowego człowieka wynosi 1-3 minuty. Samo krzepnięcie krwi (hemokoagulacja, krzepnięcie, hemostaza plazmowa, hemostaza wtórna) to złożony proces biologiczny tworzenia się nici białek fibrynowych we krwi, które polimeryzują i tworzą skrzepy krwi, w wyniku czego krew traci płynność, nabierając tandetnego konsystencja. Krzepnięcie krwi u zdrowego człowieka zachodzi lokalnie, w miejscu powstania pierwotnego czopu płytkowego. Charakterystyczny czas tworzenia skrzepu fibrynowego wynosi około 10 minut. Krzepnięcie krwi jest procesem enzymatycznym.

Założycielem współczesnej fizjologicznej teorii krzepnięcia krwi jest Alexander Schmidt. W badaniach naukowych XXI wieku prowadzonych na bazie Centrum Badań Hematologicznych pod kierownictwem Ataullakhanova F.I. przekonująco wykazano, że krzepnięcie krwi jest typowym procesem autofalowym, w którym znaczącą rolę odgrywają efekty pamięci bifurkacyjnej.

Encyklopedyczny YouTube

• 1 / 5

  Proces hemostazy sprowadza się do powstania skrzepu płytkowo-fibrynowego. Tradycyjnie dzieli się go na trzy etapy:

  1. tymczasowy (pierwotny) skurcz naczyń;
  2. tworzenie czopu płytkowego w wyniku adhezji i agregacji płytek krwi;
  3. cofnięcie (skurczenie i zagęszczenie) czopu płytkowego.

  Uszkodzeniu naczyń towarzyszy natychmiastowa aktywacja płytek krwi. Adhezja (przyklejanie) płytek krwi do włókien tkanki łącznej na brzegach rany jest spowodowana działaniem czynnika glikoproteinowego von Willebranda. Równolegle z adhezją następuje agregacja płytek krwi: aktywowane płytki krwi przyczepiają się do uszkodzonych tkanek i do siebie nawzajem, tworząc agregaty blokujące drogę do utraty krwi. Pojawia się czop płytkowy.

  Z płytek krwi, które uległy adhezji i agregacji, intensywnie wydzielają się różne substancje biologicznie czynne (ADP, adrenalina, noradrenalina i inne), co prowadzi do wtórnej, nieodwracalnej agregacji. Równolegle z uwalnianiem czynników płytkowych powstaje trombina, która oddziałując na fibrynogen tworzy sieć fibrynową, w której utkną pojedyncze czerwone i białe krwinki – powstaje tzw. skrzep płytkowo-fibrynowy (czop płytkowy). Dzięki kurczliwemu białku trombosteninie płytki krwi są przyciągane do siebie, czop płytkowy kurczy się i pogrubia, następuje jego cofanie.

  Proces krzepnięcia krwi

  Proces krzepnięcia krwi to w przeważającej mierze kaskada proenzymowo-enzymowa, w której proenzymy przechodząc w stan aktywny, nabywają zdolność do aktywacji innych czynników krzepnięcia krwi. W najprostszej formie proces krzepnięcia krwi można podzielić na trzy fazy:

  1. faza aktywacji obejmuje zespół kolejnych reakcji prowadzących do powstania protrombinazy i przejścia protrombiny do trombiny;
  2. faza krzepnięcia- tworzenie fibryny z fibrynogenu;
  3. faza cofania- tworzenie gęstego skrzepu fibrynowego.

  Schemat ten został opisany w 1905 roku przez Morawitza i nadal nie stracił na aktualności.

  Od 1905 roku nastąpił znaczny postęp w szczegółowym zrozumieniu procesu krzepnięcia krwi. Odkryto kilkadziesiąt nowych białek i reakcji biorących udział w procesie krzepnięcia krwi, który ma charakter kaskadowy. Złożoność tego systemu wynika z konieczności regulacji tego procesu.

  Nowoczesne przedstawienie z fizjologicznego punktu widzenia kaskady reakcji towarzyszących krzepnięciu krwi przedstawiono na ryc. 2 i 3. W wyniku zniszczenia komórek tkankowych i aktywacji płytek krwi uwalniane są białka fosfolipoproteinowe, które wraz z czynnikami osoczowymi X a i Va oraz jonami Ca 2+ tworzą kompleks enzymatyczny aktywujący protrombinę. Jeśli proces krzepnięcia rozpoczyna się pod wpływem fosfolipoprotein uwalnianych z komórek uszkodzonych naczyń lub tkanki łącznej, mówimy o zewnętrzny układ krzepnięcia krwi(zewnętrzny szlak aktywacji krzepnięcia lub szlak czynników tkankowych). Głównymi składnikami tego szlaku są 2 białka: czynnik VIIa i czynnik tkankowy. Kompleks tych 2 białek nazywany jest także zewnętrznym kompleksem tenazy.

  Jeżeli inicjacja następuje pod wpływem czynników krzepnięcia obecnych w osoczu, stosuje się termin wewnętrzny układ krzepnięcia. Kompleks czynników IXa i VIIIa, który tworzy się na powierzchni aktywowanych płytek krwi, nazywany jest tenazą wewnętrzną. Zatem czynnik X może być aktywowany zarówno przez kompleks VIIa-TF (tenaza zewnętrzna), jak i kompleks IXa-VIIIa (tenaza wewnętrzna). Zewnętrzny i wewnętrzny układ krzepnięcia krwi uzupełniają się.

  W procesie adhezji zmienia się kształt płytek krwi – stają się one okrągłymi komórkami z kolczastymi wyrostkami. Pod wpływem ADP (częściowo uwalnianego z uszkodzonych komórek) i adrenaliny wzrasta zdolność płytek krwi do agregacji. Jednocześnie uwalniana jest z nich serotonina, katecholaminy i szereg innych substancji. Pod ich wpływem światło uszkodzonych naczyń zwęża się i dochodzi do niedokrwienia czynnościowego. W końcu naczynia zostają zamknięte przez masę płytek krwi przylegających do krawędzi włókien kolagenowych na krawędziach rany.

  Na tym etapie hemostazy pod wpływem tromboplastyny ​​tkankowej powstaje trombina. To on inicjuje nieodwracalną agregację płytek krwi. Reagując ze specyficznymi receptorami w błonie płytek krwi, trombina powoduje fosforylację białek wewnątrzkomórkowych i uwolnienie jonów Ca 2+.

  W obecności jonów wapnia we krwi, pod wpływem trombiny, następuje polimeryzacja rozpuszczalnego fibrynogenu (patrz fibryna) i tworzenie bezstrukturalnej sieci nierozpuszczalnych włókien fibrynowych. Od tego momentu powstałe elementy krwi zaczynają być w tych niciach filtrowane, co powoduje dodatkowe usztywnienie całego układu, a po pewnym czasie tworzy się skrzep płytkowo-fibrynowy (skrzeplina fizjologiczna), który z jednej strony zatyka miejsce pęknięcia, z jednej strony zapobiegając utracie krwi, a z drugiej - blokując przedostawanie się substancji zewnętrznych i mikroorganizmów do krwi. Na krzepnięcie krwi wpływa wiele schorzeń. Na przykład kationy przyspieszają ten proces, a aniony go spowalniają. Ponadto istnieją substancje, które całkowicie blokują krzepnięcie krwi (heparyna, hirudyna i inne) i aktywują je (trucizna żmijowa, ferakryl).

  Wrodzone zaburzenia układu krzepnięcia krwi nazywane są hemofilią.

  Metody diagnostyki krzepnięcia krwi

  Całą gamę badań klinicznych układu krzepnięcia krwi można podzielić na dwie grupy:

  • testy globalne (integralne, ogólne);
  • testy „lokalne” (specyficzne).

  Testy globalne charakteryzują wynik całej kaskady krzepnięcia. Nadają się do diagnozowania ogólnego stanu układu krzepnięcia krwi i nasilenia patologii, biorąc jednocześnie pod uwagę wszystkie czynniki wpływające. Metody globalne odgrywają kluczową rolę na pierwszym etapie diagnozy: dają integralny obraz zmian zachodzących w układzie krzepnięcia i pozwalają przewidzieć tendencję do całościowej hiper- lub hipokoagulacji. Testy „lokalne” charakteryzują wynik pracy poszczególnych części kaskady układu krzepnięcia krwi, a także poszczególnych czynników krzepnięcia. Są niezbędne do ewentualnego wyjaśnienia lokalizacji patologii z dokładnością współczynnika krzepnięcia. Aby uzyskać pełny obraz hemostazy pacjenta, lekarz musi mieć możliwość wyboru badania, którego potrzebuje.

  Globalne testy:

  • oznaczanie czasu krzepnięcia krwi pełnej (metoda Mas-Magro lub metoda Morawitza);
  • test generacji trombiny (potencjał trombiny, potencjał trombiny endogennej);

  Testy „lokalne”.:

  • czas częściowej tromboplastyny ​​po aktywacji (aPTT);
  • test czasu protrombinowego (lub test protrombinowy, INR, PT);
  • wysoce wyspecjalizowane metody identyfikacji zmian stężenia poszczególnych czynników.

  Wszystkie metody mierzące odstęp czasu od momentu dodania odczynnika (aktywatora rozpoczynającego proces krzepnięcia) do powstania skrzepu fibrynowego w badanym osoczu należą do metod krzepnięcia (od angielskiego clot).

  Przykłady zaburzeń krzepnięcia krwi:

  Zobacz też

  Notatki

  1. Ataullakhanov F.I., Zarnitsyna V. I. , Kondratowicz A. Yu., Lobanova E. S., Sarbash V. I. Specjalna klasa fal automatycznych – fale automatyczne z przystankiem – określa przestrzenną dynamikę krzepnięcia krwi (ros.) // UFN: czasopismo. - 2002 r. - T. 172, nr 6. - s. 671-690. -